情景重现
我们在制备含药血清的时候,是不是会有这样的疑惑:含药血清用SD大鼠,然后做细胞实验,最后做疾病模型动物和药效时选择了小鼠,是否需要前后一致用同类型的实验动物呢?
本期我们查阅了一些文献,在这里跟大家聊聊复方及含药血清细胞实验和疾病动物模型的选择问题。
首先看权威期刊综述描述
《中草药》期刊:中药血清药理学、血清药物化学的研究概况及展望
这里引用下其中“1.2.1”项下内容:
血清药理学实验动物的选择要遵循的原则是使体外培养细胞在该种动物血清中生长良好、形态正常,对照组血清质量稳定,并且血清添加量高。一般选择与人类生物特性尽量相近的动物,从而缩小或避免动物血清和人血清在理化、生物等特性上的差异。离体器官、组织、细胞的供体动物和含药血清的供体动物也应尽量同一来源,因此选用的实验动物以大鼠、小鼠居多。另有学者认为,药物临床所应用的患者均存在一定程度的病理状态,当中药应用于病理状态下的实验动物,其作用部位有效成分的血药浓度与正常状态下相比有差异。有学者比较了正常状态下和病理状态下大鼠ig清肝化瘀方药后含药血清对肝癌细胞SMMC-7721的作用,发现前者有轻微的抑制作用, 而后者有明显的抑制作用并且能诱导肝癌细胞凋亡,提示在大鼠病理状态下制备的血清中有效成分与浓度可能发生变化,对肿瘤细胞的抑制作用更强。但也有学者将大鼠进行造模,观察心肌缺血模型大鼠与正常大鼠ig双参宁心方后的血清对缺氧/复氧H9C2细胞的影响,结果发现模型与正常大鼠含药血清对H9C2细胞活力均有所提高,但正常大鼠含药血清组细胞总体活力强于模型组。因此,选择健康动物还是模型动物需要进一步探讨。
从上面这段原文来看,含药血清的制备最好选择细胞实验所用细胞系来源一致的实验动物,这个基本上明确了,但是要不要选择模型动物目前还是没有明确的说明。
已发表实验性发文章案例
1.中文:
1.1 参芪地黄汤含药血清对脂多糖诱导人肾小球内皮细胞损伤的保护作用及机制研究
这篇文章制备血清用的是Wister大鼠,细胞是人源的;
1.2 葛根芩连汤含药血清对缺氧诱导HepG2肝癌细胞糖代谢的影响及机制研究
这篇文章制备血清用的是SD大鼠,细胞是人源的;
1.3 壮骨健膝方对巨噬细胞极化的影响及机制研究
这篇文章制备血清用的是新西兰兔,细胞是人源的;
1.4 健脾补肾活血方含药血清调控PI3K/Akt信号通路影响大鼠内皮祖细胞功能的机制
这篇文章制备血清用的是SD大鼠,细胞是SD大鼠中提取的;
1.5 基于IHH-Gli信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清调控大鼠膝关节软骨细胞肥大分化作用机制
这篇文章制备血清用的是SD大鼠,细胞是SD大鼠中提取的;
1.6 滋肾通络方干预小鼠Th17细胞分化和活性的作用研究
这篇文章制备血清用的是SD大鼠,细胞是C57BL/6雄性小鼠提取的;
我们可以看到中文含药血清基本也是遵循血清制备的动物和后续细胞来源一致的;如果是人源细胞的话,啮齿类的动物都有做含药血清;相对来说SD大鼠用的比较多。
2.英文SCI
因为中文要求还相对低些,一般制备完含药血清后做一些细胞实验就可以发表,不能体现后续疾病模型是否与含药血清所用动物一致。
2.1 Modified Gegen Qinlian decoction ameliorated ulcerative colitis by attenuating inflammation and oxidative stress and enhancing intestinal barrier function in vivo and in vitro (中科院小类1区)
这篇文章制备血清用的是SD大鼠,细胞是Caco-2细胞,疾病模型动物为 C57/BL6J mice;
2.2 Yi Shen Juan Bi Pill Regulates the Bone Immune Microenvironment via the JAK2/STAT3 Signaling Pathway in Vitro (Frontiers in Pharmacology)
这篇文章制备血清用的是Sprague-Dawley (SD) rats,细胞是C57/BL6J mice制备的;
2.3 Yang-xin-xue keli exerts therapeutic effects via regulating mitochondrial homeostasis and function in doxorubicin-induced rat heart failure(Frontiers in Pharmacology)
这篇文章制备血清和疾病动物模型用的都是Sprague-Dawley (SD) rats,细胞实验是大鼠源H9c2 细胞系;
2.4 Anti-tumor effect of Yanggan Huayu granule by inducing AKT-mediated apoptosis in hepatocellular carcinoma(Journal of Ethnopharmacology)
这篇文章制备血清用的是SD rats,动物实验用mice,细胞实验是HepG2, SMMC-7721 and L02 cell lines细胞系;
总结
综合以上文章论述,我们选择含药血清制备的动物尽量选择细胞实验所用细胞系相同的动物,如果不做细胞实验一般选择SD大鼠;另外,疾病模型动物根据已发表SCI来看,没有具体要求血清来源和动物实验一致。主要就这两点。
相信随着中医药发展,做含药血清科研人员越来越多,出现问题边实践边改进,一定会慢慢完善的!
转自:“如沐风科研”微信公众号
如有侵权,请联系本站删除!