JAFC. 基于高特异性单克隆抗体的4-甲基氨基安替比林侧向流动免疫分析方法的建立

以下文章来源于分析化学方法 ，作者科研小组

全文简介

为了避免由于抗体与结构类似物(尤其是目标化合物的代谢物)的交叉反应性而导致免疫测定中的假阳性结果，制备高度特异性的抗体至关重要。当制备高度特异性抗体时，在设计半抗原时保留目标化合物的特征结构是重要的。在这里，我们设计了一种新的半抗原，4-((1，5-二甲基-3-氧代-2-苯基-2，3-二氢-1H-吡唑-4基)氨基)甲基)苯甲酸，命名为AA-BA，以提高抗体检测4-甲基氨基安替比林(MAA)的特异性，4-甲基氨基安替比林是一种重要的解热镇痛和抗炎药物安乃近的残留标记物。半抗原的结构特征与MAA的几乎相同。经过实验验证，制备了单克隆抗体6A4 (mAb 6A4)，其半最大抑制浓度(IC50)值为4.03 ng/mL，与安乃近代谢物和其他抗生素的交叉反应性可忽略不计。此外，开发了基于胶体金的特异性侧向流动免疫测定(LFA)条，用于筛查牛奶中截止值为25 ng/mL的MAA。开发的LFA是快速准确检测MAA的有用工具。

简介

DIP（A）的代谢途径。haptens（B）和人工抗原（C）的合成途径。

H1、H2和H3（A）的化学结构。类似物和haptens（B）的表面ESP分布。类似物和haptens（C）的Mulliken原子电荷。

CG-LFA检测原理

线8C-9C至14N-16C的分子重叠和水平角，适用于（A）MAA、FAA、AAA和AA；（B）H1和FAA（注释角度为FAA）；（C）H1和AAA（注释角度为AAA）；（D）AA-BA和MAA（注释角度为MAA）。所有使用的分子模型都用于最低能量构象。

具有不同涂层抗原的mAb 3H4和mAb 6A4的标准曲线。

牛奶样本（纳克/毫升）（A）中添加的MAA的LFA图像。LFA（B）的相应标准曲线。LFA（C）的特殊性。LFA与12个牛奶样本的性能（D）。

相关成果以“Development of a Lateral Flow Immunoassay Based on a Highly Specific Monoclonal Antibody To Detect 4-Methylaminoantipyrine”，发表在国际学术期刊“Journal of Agricultural and Food Chemistry”上。

文献链接：点击阅读原文

https://doi.org/10.1021/acs.jafc.3c02421

转自：“NANO学术”微信公众号

如有侵权，请联系本站删除！