基于纳米荧光素酶的SARS-CoV-2 3C样蛋白酶快速检测方法研究

最近，各种新技术层出不群，如用于核衣壳蛋白和抗体检测的微流控芯片、用于S蛋白检测的液体比色法和电化学方法和用于病毒蛋白酶3-胰凝乳蛋白酶样蛋白酶（3CLpro）检测的比色棉签，也有报道用于SARS-CoV-2检测。Dutta等人于2022年开发出新型比色棉签用于3CLpro检测，是一种精密便携的检测方法。然而，棉签上预吸附的化学物质缺乏安全性评估且敏感性低，限制了其在SARS-CoV-2早期筛查中的进一步应用。近日，深圳技术大学Liu等人描述了一种易于执行的纳米荧光素酶（nLuc）传感器，用于快速检测由SARS-CoV-2编码的3CLpro。该技术基于重组nLuc通过3CLpro的切割反应。基于nLuc的检测是一种通用的一步法，在检测中具有天然特异性。稳定性、灵敏度、检测范围和响应时间得到充分表征。3CLpro检测在人工和人唾液中的成功应用以及抗病毒药物筛选表明该方法可以一步高灵敏度地定量3CLpro。凭借其特性，基于nLuc的检测有望在SARS-CoV-2以及其他类型的冠状病毒感染的辅助诊断中找到广泛的应用。

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该传感器的检测可在60分钟内完成，并可一步分析96个反应。3CLpro的检测限为200 pg/mL（5.8 pM或10 pg/assay），具有出色的选择性。快速、具体和方便操作的优势归因于基于nLuc检测的POC特征。

目前，基于磁珠的全自动样本处理仪和全自动化学发光分析仪已广泛应用于临床。借助成熟的工业技术，该检测可以轻松结合这两种仪器的互补功能，开发出一种用于快速检测COVID-19的一体化自动检测仪器。一体式仪器可设计用于POC测试和家庭使用测试，或通过使用便携式、经济实惠且简单的检测器进行社区高通量筛选。凭借3CLpro检测流程简单、特异性和灵敏度高等诸多优势，他们预计该方法在SARS-CoV-2以及HIV-1、HCV等冠状病毒的互补诊断中具有良好的潜力。

论文题目：Simple Nano-Luciferase-Based Assay for the Rapid and High-Throughput Detection of SARS-CoV-2 3C-Like Protease

原文链接：https://doi.org/10.1021/acs.analchem.2c02590

转自：“NANO学术”微信公众号

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