PBJ | 山东农业大学李向东教授团队通过科学组合识别不同表位的单克隆抗体，实现所有PVY分离物全覆盖检测

血清学方法在植物病毒的检测中起着至关重要的作用。但是，多克隆抗体可能会与非靶标病毒发生交叉反应，导致出现错检。单克隆抗体具有更高的特异性，但有些单克隆抗体只能检测到部分病毒分离物，导致漏检现象。马铃薯Y病毒（potato virus Y，PVY）是马铃薯Y病毒属（Potyvirus）的代表种，主要侵染马铃薯、烟草、辣椒、番茄等茄科作物，严重影响作物产量和品质。之前研究表明，利用国际上广泛使用的PVY单克隆抗体MAb1128、MAb1129和MAb1130检测时，20.10%、48.57%和12.73%的PVY分离物会出现漏检现象（Tian等，2014）。

近日，Plant Biotechnology Journal在线发表了山东农业大学植物保护学院李向东教授团队题为“Epitope mapping and a cocktail of monoclonal antibodies to achieve full detection coverage of potato virus Y”的研究论文，该研究筛选到识别PVY衣壳蛋白（coat protein，CP）不同表位的4个单克隆抗体，并得到了能检测所有PVY分离物的单克隆抗体组合。

研究人员从54个单克隆抗体中筛选到4个识别不同表位的单克隆抗体N1、M1、M2和C1。通过删除突变以及丙氨酸扫描等分析，确定N1、M1、M2和C1识别的最小表位分别为4TIDAGGSTK12，37GTSGTHTVP45，89QFDTWYE95和261LLGVKN266。这四个单克隆抗体识别的抗原表位与国际上广泛使用的PVY单克隆抗体MAb1128、MAb1129和MAb1130不同，而且在PVY CP中相对保守。截至2022年4月12日，GenBank中有1885个PVY CP序列，含有N1、M1、M2和C1识别表位的PVY分离物个数分别为694、1853、1843和1851。将检测范围较广的M1、M2和C1进行组合，发现M1和M2组合可检测所有1885个PVY分离物，M1和C1组合可检测1883个PVY分离物，M2和C1组合可检测1876个PVY分离物。该研究通过将识别CP不同抗原表位的单克隆抗体进行科学组合，实现了所有分离物的全覆盖检测。这种方法可应用于其它植物病毒和动物病毒所有分离物的检测，可有效防止漏检现象。

山东农业大学硕士研究生赵翠玲、朱青和牟修岐为共同第一作者，李向东教授和闫志勇博士为共同通讯作者，耿超副教授、田延平教授和原雪峰教授参与了研究工作。该研究受到国家自然科学基金国际合作重点项目(31720103912)以及山东省泰山学者建设工程(TS201712023)的资助。

原文链接：

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1111/pbi.14094

转自：“植物生物技术Pbj”微信公众号

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