棉花学报 | 陆地棉钙依赖蛋白激酶GhCDPK28-A10参与抗黄萎病的功能分析
2023/4/24 9:17:09 阅读:122 发布者:
以下文章来源于中国棉花 ,作者棉花学报
摘 要
【目的】解析GhCDPK28-A10在棉花黄萎病反应的作用机制,并为棉花抗病育种提供基因资源。
【方法】从棉花基因组数据库获得GhCDPK28-A10基因同源序列,进行生物信息学分析。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)方法检测经大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)、茉莉酸甲酯(methyl jasminate, MeJA)、水杨酸(salicylic acid, SA)或H2O2处理棉株中GhCDPK28-A10基因的表达量变化。通过病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术验证GhCDPK28-A10在棉花抗黄萎病中的作用。
【结果】进化树和基因结构分析表明,陆地棉基因组GhCDPK28的6个同源蛋白具有相似数量的基序和CDPK家族典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域;启动子区域的序列分析发现GhCDPK28-A10包含响应茉莉酸(jasmonic acid, JA)的顺式作用元件。组织特异性表达分析表明GhCDPK28-A10在根、茎和真叶中均表达,且在真叶中表达水平最高。在大丽轮枝菌、MeJA和H2O2胁迫诱导下,GhCDPK28-A10的表达量显著升高。VIGS沉默GhCDPK28-A10的棉株中抗病相关基因PR1、NPR1、PR4表达增强;JA合成负调控基因JAZ1表达量降低,说明随着CDPK28-A10表达水平的降低,JAZ1对JA合成的抑制作用减弱,活性氧富集,进而增强棉株的黄萎病抗性。
【结论】GhCDPK28-A10通过调控防御相关基因的表达,负向调控棉花对黄萎病的抗性反应,是提高棉花黄萎病抗性的候选基因。
关键词:棉花;黄萎病;钙依赖性蛋白激酶;抗病基因;病毒诱导的基因沉默
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棉花学报,2023,35(1):17-28.
https://doi.org/10.11963/cs20220047
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