植物制备单克隆抗体对新冠 BA.5变体的效力测试

严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2（SARS-CoV-2）在全球范围内持续存在，同时不断出现具有免疫逃避性的变种,大多数作为SARS-CoV-2感染疗法的单克隆抗体（mAbs）也因此失去了对变体及其亚变体的效用。2022年12月15日，Plant Biotechnology Journal在线发表了题为：“The potency and synergy of plant-made monoclonal antibodies against the BA.5 variant of SARS-CoV-2”的研究论文，基于ACE2的治疗方法开发了包含两个新版本的mAbs组成即tixagevimab和cilgavimab的单克隆抗体，这些植物来源的mAbs能有效地中和SARS-CoV-2的多个亚型，对包括 BA.5和BA.4.6在内的变体具有更强的作用效力。

作者将tixagevimab和cilgavimab的可变区域基因融合到人IgG1骨架上，然后在转基因ΔXFT 本氏烟草中瞬时这些mAbs，其中用于合成植物特异性木糖和核心岩藻糖的糖基转移酶已被稳定敲除（RNAi）。植物中cilgavimab（pCilgavimab）的表达量在农杆菌侵染渗透后6天达到约726微克mAb/克鲜叶重量（FLW）的峰值，tixagevimab（pTixagevimab）的表达在一天前达到峰值，约为403微克mAb/克FLW。对保守的Fc糖体的糖类分析表明，两种mAb都含有高度同质的N-连接糖类，两种mAb都能特异性地识别SARS-CoV-2的RBD，并能在病灶形成试验中中和变体（B.1.1.529），其IC50分别为2.23μg/ml和19.68μg/ml。为了分析pCilgavimab和pTixagevimab作为双重mAb混合抗体对Omicron SARS-CoV-2的中和协同作用，作者将mAbs混合，并在各自的IC20、IC25和IC50浓度下进行单个mAb复制，利用SynergyFinder.org网站的四种模型分析单个mAb的中和百分比值。结果发现，pCilgavimab和pTixagevimab在所有三种测试浓度下都显示出协同作用。

作者进一步用基于假病毒的中和试验测试了两种植物表达的mAbs对抗BA.4/5 Omicron亚变体，研究发现pCilgavimab和pTixagevimab都能中和BA.4/5，与以前的研究结果一致，cilgavimab对BA.4/5伪病毒的效力增加，而tixagevimab对BA.4/5的效力降低。此外，两种mAbs对B.1.1.529变体观察到的中和协同作用延续到了BA.4/5变体上，尽管效力降低，但对最新的显性变体BA.4.6（表 S1），它已被证明对迄今为止开发的所有其他mAbs有抗性。

这是在植物中生产构成Evusheld的两种mAbs的第一个报告，也是混合抗体对Omicron变体的首个协同分析。这两种mAbs都能中和多种SARS-CoV-2变体，其中pCilgavimab在中和B.1.1.529和BA.4/5变体方面比pTixagevimab的效力更大。作为一种组合，这些mAbs对亲代Omicron变体显示出中和的协同作用，对BA.4/5和BA.4.6变体仍然有效。作者推测这些植物表达的mAbs有可能比哺乳动物表达的mAbs治疗效果更佳，为基于植物开发稳定、有效的mAbs作为SARS-CoV-2的治疗药物打下了坚实基础。

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/epdf/10.1111/pbi.13980

转自：“植物生物技术Pbj”微信公众号

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